Pipettaggio inverso
Il pipettaggio inverso (o reverse pipetting) è una tecnica che permette di erogare una quantità di liquido misurata per mezzo di pipette basate su spostamento d'aria . La tecnica è principalmente consigliata per soluzioni schiumogene o con un'elevata viscosità in quanto riduce il rischio di schizzi, schiuma o formazione di bolle. Il pipettaggio inverso è più preciso nel dispensare piccoli volumi di liquidi contenenti proteine e soluzioni biologiche rispetto al forward pipetting, che è usato soprattutto per le soluzioni acquose, come ad esempio soluzioni tampone, acidi o alcali diluiti .
Come funziona
Durante il pipettaggio inverso, il volume aspirato nel puntale della pipetta è più grande rispetto a quello che si vuole erogare. Infatti l'eccesso di volume compensa il liquido che rimane come pellicola all'interno della punta durante l'erogazione. L'aspirazione del liquido si ottiene creando vuoto per mezzo di un pistone metallico e ceramico presente all'interno della pipetta. Mentre il pistone si muove verso l'alto, guidata dalla depressione dello stantuffo, si crea un vuoto nello spazio lasciato libero dal pistone stesso. Quest'ultimo sposta l'aria che sarà sostituita dal liquido aspirato nel puntale e quindi disponibile per il trasporto e l'erogazione altrove. Tale tecnica si basa su pipette, strumenti molto precisi ed accurati. Tuttavia, poiché si basa su spostamento d'aria, essi sono soggetti a imprecisioni dovute a cambiamenti climatici,[1], in particolare temperatura e pressione, e l'utente.[2] Per queste ragioni le pipette devono essere accuratamente mantenute e calibrate,[3] e gli utenti devono essere formati per esercitare la tecnica corretta e coerente
Soluzioni alternative per migliorare la riproducibilità e la precisione delle operazioni di pipettaggio manuali[4] si basano su robot antropomorfici in grado di manipolare pipette manuali.
Tecnica
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Note
- ^ Factors affecting the accuracy of Air Displacement Pipettes.
- ^ Human Errors Most Common Pipette Problem. URL consultato il 22 gennaio 2020 (archiviato dall'url originale il 10 luglio 2013).
- ^ Pipette Calibration System Minimizes Pipetting Error, Strengthens Data Integrity. URL consultato il 15 febbraio 2014 (archiviato dall'url originale l'11 maggio 2012).
- ^ Andrew performs in accordance with ISO-8655 standard (archiviato dall'url originale il 22 ottobre 2012).
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